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FAQ

Avantages de la méthode OSNA®

Quelle est la signification de l'abréviation OSNA?

OSNA® est l’acronyme anglais pour «one-step nucleic acid amplification», qui signifie amplification d’acide nucléique en une étape. « Cette méthode implique l’homogénéisation du ganglion lymphatique, suivie de l’analyse de l’expression moléculaire d’une molécule d’intérêt, dans le cas présent, l’ARNm de la CK19, par la technique d'amplification génique isothermique après transcription inverse (RT-LAMP). L’appellation OSNA® est la propriété de Sysmex.

Quel est le principe de la réaction LAMP?

La réaction LAMP (Loop-mediated Isothermal Amplification) est une méthode d’amplification d’acide nucléique simple et rapide, développée exclusivement par Eiken Chemical Co., Ltd. Elle se caractérise par l’emploi de 6 amorces différentes spécifiquement conçues pour détecter 6 à 8 zones de la séquence cible. La réaction utilise une ADN polymérase dotée d’une activité de déplacement du brin, et se déroule à une température constante avoisinant 65 °C. Les opérations d’amplification et de détection de la séquence cible peuvent être effectuées en une seule étape.

Quelles sont les caractéristiques de la méthode OSNA?

Cette méthode se caractérise par

  • L'absence d'étape de purification d'ARN.
  • La rapidité de la réaction, adaptée à une utilisation peropératoire du système.
  • L’utilisation de 6 amorces garantissant une haute spécificité de l'ARNm cible.
  • Le concept de dosage optimal empêchant l’amplification des pseudogènes CK19.
  • L’amplification génique à une température constante de 65 °C, empêchant l’amplification de l’ADN génomique.

Quelle est la durée d’une réaction d’amplification avec l'analyseur automatisé RD100i ?

Elle est de 16 minutes.

Quelle est la durée complète d’une analyse d’échantillons?

L’analyse dure 30 minutes environ, incluant le pré-traitement d’un ganglion lymphatique, et 40 minutes environ pour 4 ganglions.

Combien de ganglions lymphatiques peuvent être analysés simultanément?

L'appareil peut analyser simultanément jusqu'à 4 ganglions lymphatiques.

Le lysat restant issu des ganglions lymphatiques peut-il être conservé?

Le lysat peut être stocké à -80°C ou dans de l’azote liquide.

Le colorant bleu interfère-t-il avec la réaction OSNA?

Le colorant bleu utilisé pour l’identification chirurgicale des ganglions lymphatiques sentinelles n’interfère pas avec la réaction OSNA®.

Questions concernant les réactifs

Quelle est la température requise pour le stockage des réactifs (Lynorhag et Lynoamp)?

Veuillez stocker le réactif d’homogénéisation (Lynorhag) à +4°C et le kit d’amplification (Lynoamp) à -20°C.

Combien de fois les solutions d’amorces, de contrôles et d’étalons peuvent-elles être congelées et décongelées?

Les solutions peuvent être congelées et décongelées 5 fois au maximum.

Pendant combien de temps les réactifs peuvent-ils rester hors du réfrigérateur – que ce soit sur la glace ou à l’intérieur de l’instrument?

Les réactifs LynoAmp peuvent être conservés sur la glace ou dans le système automatisé RD100i pendant 6 heures environ.

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