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Calendrier scientifique – Février 2023

Phagocytose des plaquettes EDTA-dépendante due à une infection sous-jacente

Quel est le signal de mesure capable d’indiquer une activation des neutrophiles (NEUT-RI) ?

Le signal de fluorescence latérale (SFL)

Le signal de diffusion latérale (SSC)

La hauteur de pic sur l’histogramme PLT

Le signal de diffusion frontale (FSC)

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Contexte scientifique

Stratégies des neutrophiles dans la réponse immunitaire

Une infection bactérienne conduit à un état inflammatoire dans le corps humain ; le système immunitaire inné est alors stimulé.

Dans la phase précoce de la réponse immunitaire innée, les neutrophiles sont activés et constituent une première ligne de défense non spécifique contre les agents pathogènes. Ils utilisent pour cela deux stratégies différentes [1]. L’une de ces stratégies est la sécrétion de cytokines pro-inflammatoires et de chimiokines, qui attirent d’autres neutrophiles et activent d’autres réponses de l’hôte à l’infection [2].

En outre, les neutrophiles éliminent les agents pathogènes par phagocytose et identifient les antigènes pour activer la réponse immunitaire adaptée [1]. Durant cette phase, les neutrophiles sont fortement activés, ce qui se traduit par une augmentation de leur granularité et de leur activité métabolique. Cette augmentation de la densité de coloration et du nombre de granules dans le neutrophile est appelée « granulation toxique ». Autre indication de l’activation des neutrophiles : la présence de vacuoles dans le cytoplasme, qui apparaissent en cas d’activité phagocytaire accrue [3]. Les neutrophiles activés présentent également une activité métabolique plus élevée dans le cytoplasme, en raison de la production de chimiokines et de cytokines.

Un autre mécanisme observé chez les neutrophiles activés est la génération de pièges extracellulaires neutrophiles (NET), qui ont été décrits comme des structures en forme de toile composées d’ADN, d’histones et de granules, destinées à piéger et à éliminer les agents pathogènes [4].

Mesure d’une réactivité et d’une granularité élevées des neutrophiles par des analyseurs d’hématologie

Sur les analyseurs d’hématologie de la série XN, une réactivité plus élevée des neutrophiles provoque une augmentation de l’intensité de fluorescence (SFL) dans le canal de mesure WDF, tandis qu’une granularité plus élevée provoque une augmentation de l’intensité de diffusion (SSC).

Avec les paramètres de diagnostic « Extended Inflammation Parameters » NEUT-RI (intensité de réactivité des neutrophiles) et NEUT-GI (intensité de granularité des neutrophiles), ce phénomène devient mesurable.

Des études ont montré qu’une augmentation de la NEUT-RI et de la NEUT-GI est spécifiquement présente en cas d’infections bactériennes [5,6].

Comportement et devenir des plaquettes dans certaines conditions sous-jacentes

Dans de très rares cas, des conditions sous-jacentes telles que des infections bactériennes ou des maladies oncologiques peuvent déclencher la production d’auto-anticorps dirigés contre les plaquettes [7]. Ceux-ci surviennent naturellement chez environ 0,1 % de la population générale et jusqu’à 0,21 % des patients hospitalisés [8].

L’anticoagulant EDTA a un effet chélatant sur la membrane plaquettaires. En éliminant les ions Ca2+, il provoque un changement de conformation qui expose des antigènes cryptiques sur les récepteurs GPIIb/IIIa présents sur la membrane des plaquettes. Les auto-anticorps se lient alors aux antigènes exposés, qui activent des voies conduisant à l’agglutination plaquettaire, au satellitisme et à la phagocytose par les neutrophiles et, plus rarement, par les monocytes [9-11].

Ce processus appelé « pseudothrombocytopénie EDTA-dépendante » n’est pas une maladie mais un phénomène in vitro. Néanmoins, son identification est cruciale pour éviter des traitements et la prise de médicaments inutiles. La présence d’une pseudothrombocytopénie étant souvent associée à des maladies auto-immunes ou à des infections, elle doit être suivie par une recherche d’éventuelles maladies sous-jacentes [9]. Les pseudothrombocytopénies provoquées par le citrate et l’héparine sont extrêmement rares [12].

Dans ce cas, la pseudothrombocytopénie EDTA-dépendante a probablement été déclenchée par une infection à Klebsiella pneumoniae.

Interprétation des résultats

Un patient se présente à l’hôpital, se plaignant de malaises et de fièvre, avec des vomissements et des symptômes d’infection des voies urinaires ou de pyélonéphrite. Une infection à Klebsiella pneumoniae est confirmée ultérieurement par hémoculture.

Les résultats de la formule sanguine obtenus avec un analyseur de la série XN montrent des résultats normaux pour les globules blancs et les globules rouges ainsi qu’une légère thrombocytopénie. Une augmentation du paramètre « Extended Inflammation Parameter » NEUT-RI (NEUT-RI 65,0 FI ; intervalles de référence 42,0–50,6 FI [13]) est observée. Le marqueur « PLT Clumps? » est également déclenché.

L’imagerie numérique du frottis sanguin, réalisée à partir d’un échantillon de sang EDTA, révèle une forte activation des neutrophiles, ainsi qu’un satellitisme plaquettaire et une phagocytose plaquettaire par les neutrophiles et les monocytes (voir fig. 3). Un frottis d’un autre échantillon de sang prélevé 14 heures plus tard montre toujours un satellitisme et une phagocytose, ainsi qu’une vacuolisation et une destruction des neutrophiles.

Un nouvel échantillon de sang prélevé en utilisant du citrate comme anticoagulant ne montre toutefois ni satellitisme ni phagocytose.*

*) L’utilisation de citrate anticoagulant n’est pas prise en charge par Sysmex et l’impact possible sur les performances analytiques doit être validé par l’utilisateur.

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